蒸汽式滅菌柜是利用蒸汽對滅菌物品進行滅菌的，不同于水煮滅菌，蒸汽殺菌就是燒開水，之后會冒出蒸汽，而且蒸汽的溫度比較高，所以用蒸汽對物品進行滅菌的時間要比水煮滅菌少得多，可以快速滅菌，因為升溫降溫快，可以達到高溫高壓，大大縮短了滅菌時間。

　　蒸汽式滅菌柜的操作步驟：

　　1.首先取出內層滅菌桶，然后在外層鍋內加入適量的水，使水面與三角擱架相平為宜。

　　2.放回滅菌桶，裝入待滅菌物品。注意不要裝得太擠，以免妨礙蒸汽流通，影響殺菌效果。三角燒瓶與試管口端均不要與桶壁接觸，以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞。

　　3.加蓋，將蓋上的排氣軟管插入內層滅菌桶的排氣槽中。然后用兩兩對稱的方式同時旋緊相對的兩個螺栓，使螺栓的松緊一致，不要有漏氣的現象。

　　4.用電爐或煤氣加熱，同時打開排氣閥燒開水，使水沸騰以排除鍋內的冷空氣。等冷空氣*排出后，關閉排氣閥，讓鍋內溫度隨著蒸汽壓力的增加而逐漸升高。當鍋內壓力升至所需壓力時，控制熱源并保持所需時間的壓力。

　　5.滅菌時間到了，切斷電源或關掉煤氣，讓滅菌鍋內的溫度自然下降。當壓力表壓力降至0時，打開排氣閥，擰下螺栓，打開蓋子，取出滅菌物品。如果壓力沒有降到0，打開排氣閥，鍋內的壓力會突然下降，這樣容器內的培養基就會因為內外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口，導致棉塞沾染培養基而發生污染。

　　6.將取出的滅菌培養基放入37℃溫箱培養24小時，經檢查若無雜菌生長，即可待用。